上海欧玛仕生物DMEM培养基(高糖,无酚红,含胎牛血清,含双抗)检测原理
注意:DMEM完全培养基本身不是检测试剂,它是细胞体外培养的营养体系,作用是模拟体内微环境,支持哺乳动物细胞存活、增殖。下面是它的培养工作原理。
一、整体原理
该完全培养基以DMEM高糖基础培养基为基质,搭配胎牛血清、青霉素-链霉素双抗;去除酚红避免干扰后续荧光/比色实验。培养基内的氨基酸、维生素、无机盐、高浓度葡萄糖、碳酸氢钠缓冲体系,模拟动物体内渗透压与生理 pH(7.2–7.4),为体外细胞提供碳源、氮源、微量元素;胎牛血清提供贴壁因子、生长因子、激素、转运蛋白;双抗抑制细菌污染,从而维持细胞正常代谢、粘附与增殖,用于细胞培养、药物筛选、细胞活性检测等体外细胞实验。
二、各组分作用原理
1. 高糖DMEM基础培养基(4.5g/L葡萄糖)
葡萄糖:作为细胞有氧糖酵解主要碳源,满足快速增殖细胞的能量需求;
氨基酸(必需+非必需):合成蛋白质、酶、细胞结构组分;
无机盐:维持细胞内外渗透压、细胞膜电位;
碳酸氢钠缓冲体系:在5%CO₂培养箱环境稳定pH;
无酚红:酚红具有类雌激素效应,并且会干扰荧光检测、酶标吸光度读数;去掉酚红,适配流式、荧光染色、CCK-8等检测。
2. 胎牛血清(FBS)
含有多种生长因子、粘附因子、激素、脂蛋白、金属离子结合蛋白,弥补基础培养基缺少的生物活性物质,帮助细胞贴壁、促进细胞分裂增殖,保护细胞免受机械损伤。
3. 双抗(青霉素+链霉素)
青霉素:抑制革兰阳性菌细胞壁肽聚糖合成,阻止细菌增殖;
链霉素:结合细菌核糖体 30S 亚基,抑制革兰阴性菌蛋白质合成;
二者联用,预防细胞培养过程中细菌污染;对真菌、支原体无效。
三、补充:培养基成品质量检验原理
培养基出厂时会做细胞促生长试验:用指定细胞(如CHO/293T)接种在该培养基中培养,观察细胞形态、增殖速率、活率。原理:合格培养基能够支持细胞正常生长;若营养失衡、内毒素超标,细胞生长变慢、形态异常、活率下降,以此判定培养基质量是否合格。
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