欧玛仕生物介绍:血清实验原理及保存方法如下:
一、血清是什么
血清(Serum)=血液凝固后,除去血细胞和纤维蛋白原的淡黄色透明液体。
不含纤维蛋白原
含抗体、酶、激素、蛋白质、代谢物等
常用于:免疫检测、生化检测、抗体测定、ELISA 等
二、血清分离的原理
血液凝固时:
血小板+凝血因子→形成纤维蛋白网
网住红细胞、白细胞
静置 / 离心后,凝块下沉,上层清亮液体就是血清
区别:
血浆:抗凝后离心,含纤维蛋白原
血清:自然凝固后离心,不含纤维蛋白原
三、血清分离标准过程(最常用)
采血
用无抗凝剂的干燥试管(促凝管)采集静脉血。
静置凝固室温静置 30~60 分钟,让血液自然凝固。
离心3000 r/min,离心 10~15 分钟。
取血清吸取上层淡黄色清亮液体,避免吸到下面的血细胞。
保存短期:4℃
长期:-20℃ 或 -80℃ 分装冻存,避免反复冻融。
四、血清学实验的通用原理(以抗体检测为例)
核心:抗原与抗体特异性结合。
常见用途:
测病原体抗体(乙肝、新冠等)
测自身抗体
测蛋白含量(ELISA 最常用)
简单原理:
把已知抗原固定在载体上
加入待测血清
血清中的特异性抗体会和抗原结合
加酶标二抗 + 底物显色
颜色深浅 = 抗体含量多少
五、血清学实验通用步骤(ELISA 版,最典型)
包被:将抗原固定于酶标板
封闭:减少非特异性吸附
加样:加入稀释后的待测血清
孵育:抗原抗体特异性结合
洗涤:洗掉未结合物质
加酶标二抗
孵育 + 洗涤
加显色底物
加终止液
酶标仪读数,计算浓度 / 判定结果
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