欧玛仕生物猴血清操作流程介绍如下:
1. 操作前准备
首先需对实验环境进行全面清洁与消毒,优先选择生物安全柜作为核心操作区域,操作前开启生物安全柜通风系统30分钟以上,确保气流稳定。同时,检查猴血清试剂外观,确认无浑浊、沉淀、变色(如正常淡黄色变为深褐、粉红等异常颜色)及异味等变质现象,核对试剂批号、有效期及储存条件是否符合要求。
操作人员需穿戴完整的个人防护装备,包括一次性无菌手套、防护服、护目镜及口罩,若涉及大量操作或存在喷溅风险,需额外佩戴面屏。准备好无菌的移液器、吸头、离心管、培养基等配套耗材,所有耗材需经灭菌处理并在有效期内使用,提前将移液器校准至所需量程。
2. 血清解冻
猴血清需采用缓慢解冻方式,避免温度剧烈变化导致蛋白变性。从-20℃或-80℃冰箱取出后,先放入4℃冰箱冷藏过夜(约12-16小时)进行初步解冻,待血清大部分融化仅剩少量冰晶时,转移至室温(20-25℃)环境继续融化。
解冻过程中需每隔30分钟轻轻颠倒离心管(避免剧烈摇晃产生大量泡沫),使血清成分均匀混合,防止局部温度过高。严禁直接将冷冻血清放入37℃水浴锅快速解冻,若确需缩短时间,可将血清管密封后放入37℃水浴锅,保持轻微晃动,且水浴时间不得超过30分钟,同时密切观察血清状态,避免污染。
3. 血清分装
为避免血清反复冻融影响活性,解冻后的血清需及时分装。在生物安全柜内,使用无菌移液器吸取血清,按实验需求分装入无菌离心管中,每管体积建议为10-50ml(根据常规实验用量确定),分装过程中吸头需避免接触离心管管口及管壁内侧,防止交叉污染。
分装完成后,立即拧紧离心管盖,在管壁清晰标注血清名称、批号、分装日期及有效期,随后快速转移至-20℃冰箱冷冻保存,若长期储存(超过3个月),建议放入-80℃冰箱。分装操作需在30分钟内完成,避免血清在室温下暴露时间过长。
4. 血清使用
使用前将分装后的血清从冷冻环境取出,按“解冻流程”复温至室温。根据细胞培养需求,在无菌条件下将血清与基础培养基按比例混合(常规比例为5%-20%,具体比例需参考细胞株说明书),混合时采用轻柔颠倒的方式搅拌均匀,避免产生泡沫。
若血清需灭活处理(如去除补体成分),需在混合前进行:将复温至室温的血清放入56℃水浴锅,精确计时30分钟,期间每隔5分钟轻轻晃动一次,确保血清受热均匀。灭活完成后立即将血清放入冰浴中冷却至室温,再与培养基混合使用。
使用过程中,已开封的血清若一次未用完,需在24小时内放入4℃冰箱保存,且再次使用前需检查是否有变质迹象,保存时间不得超过72小时。
上海欧玛仕生物科技有限公司拥有成熟的血清加工工艺,能生产超滤血清、活性炭吸附血清、去血红蛋白血清、去抗体血清等。在售产品有胎牛血清、新生牛血清、类胎牛、小牛血清、马血清、猪血清、禽类血清、乙酰化牛血清白蛋白等,产品广泛用于细胞培养、疫苗生产、分子诊断等领域,广受业内好评。