上海欧玛仕生物0.05%胰酶-EDTA消化液(无酚红)核心成分

上海欧玛仕生物0.05%胰酶-EDTA消化液(无酚红)核心成分介绍

一、基础配方说明

1. 核心成分，胰蛋白酶0.05%：水解细胞间黏附蛋白，解离贴壁细胞；低浓度温和消化，适合娇嫩细胞（干细胞、原代细胞、免疫细胞）

EDTA（乙二胺四乙酸二钠）：螯合培养液中Ca²⁺、Mg²⁺，破坏细胞表面钙黏蛋白，辅助细胞分离，提升消化效率。

无酚红：不含pH指示剂酚红，优势：避免酚红荧光干扰流式、荧光染色、高内涵成像、共聚焦实验减少酚红对部分敏感细胞的毒性适配激素、药物筛选类细胞实验

溶剂基础：通常为Hanks平衡盐溶液（HBSS），无钙镁（CMF-HBSS），不含血清、碳酸氢钠。

2. 标准配比（1L体系）胰蛋白酶干粉：0.5g，EDTA-Na₂：0.2g（常规配套浓度），无钙镁HBSS：定容至1000mL，不含：酚红、BSA、血清、抗生素（可按需添加双抗）。

二、产品优势（对比0.25%胰酶/含酚红款）

低浓度0.05%胰酶消化作用温和，短时间处理即可脱壁，大幅降低胰蛋白酶对细胞膜表面抗原、受体、蛋白的降解损伤，适合：原代细胞、免疫细胞、干细胞、需要表面标志物检测的细胞。
荧光实验无背景干扰细胞增殖、毒性、激素诱导实验无酚红雌激素样干扰便于肉眼观察细胞沉淀、细胞碎片，无红色底色遮挡无钙镁基底钙离子会抑制胰酶活性，无钙镁配方最大化消化效果，细胞分散更均匀，不易成团。

三、适用细胞类型

推荐使用：各类原代细胞、间充质干细胞、免疫细胞、内皮细胞、肿瘤软细胞系、需要流式/荧光检测的细胞紧密连接极强、粘附力极高的细胞（如部分上皮肿瘤细胞），建议选用0.25%胰酶-EDTA。

四、标准操作流程

弃细胞旧培养基，PBS清洗细胞单层1–2次，去除血清（血清会中和胰酶活性）加入适量0.05%无酚红胰酶-EDTA（6cm皿加1mL），室温/37℃孵育。

普通细胞：1–3min；干细胞/原代细胞：1–2min，轻拍培养皿观察细胞飘起细胞脱壁后，立刻加入含血清完全培养基终止消化（血清中蛋白中和胰酶）吹打制成单细胞悬液，离心传代/检测。

五、储存与稳定性

未开封：2–8℃避光冷藏，有效期6–12个月；

分装后冻存：-20℃分装避光保存，可长期存放；避免反复冻融；

开封后：4℃1个月内用完，避免活性下降；

注意：胰酶遇高温、反复室温放置会快速失活；出现浑浊、沉淀、变色需丢弃；

六、配套应用场景

细胞传代、单细胞制备，流式细胞术（免疫表型检测），免疫荧光、共聚焦显微镜样本制备，药物筛选、细胞活力CCK-8、凋亡检测，干细胞诱导分化培养原代细胞分离、纯化。

七、与0.25%胰酶-EDTA（无酚红）

核心区别对照表指标0.05%胰酶-EDTA（无酚红）0.25%胰酶-EDTA（无酚红）胰酶浓度低，温和高，消化力强消化时间1–3min3–8min，细胞损伤极低，保护膜蛋白易损伤表面抗原，适用细胞干细胞、原代、流式样高粘附肿瘤细胞，荧光实验适配完美适配可用，但损伤细胞。

八、常见注意事项

消化前必须洗净血清，否则胰酶失效；消化切忌过度，会导致细胞死亡、增殖能力下降；做流式实验全程推荐无酚红消化液，减少荧光背景；若细胞消化困难，可延长37℃孵育时间，禁止提高胰酶浓度；无菌操作，消化液为无菌过滤成品，无需高压灭菌。

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