大鼠肝rRNA的提取操作方法

操作方法

1、称取鼠肝 15g 左右，加于10 倍体积的苯酚-甲酚混合溶液以及 10 倍体积的萘 5-二磺酸溶液.在下用匀浆器匀浆

2、将匀浆液取出置于烧杯中.2℃ 搅拌 20min,于50℃，6000g 离心 15min，弃沉淀，

3、上淸液加入三异丙萘磺酸钠，至浓度为5%,再加入 1/2 体积的苯酚-甲酚溶液，于 20℃搅拌 20min,然后以 8000g, 5℃ 离心 10 min.弃沉淀

4、在每 100ml 离心上清液屮依次加入 3g 氯化钠，2g 苯甲酸钠及 10mim-甲酌。搅拌溶解均匀后，用 8000g，5℃ 离心10min。弃上清液。

5、将沉淀物按下列顺序离心洗涤：用冷的洗涤液A 洗二次,洗涤液 B、75% 乙醇溶液各洗一次，再用无水乙醇冼二次，每次均用 25ml 后得纯的鼠肝 rRNA. 取出 rRNA，置于装有 CaCl2 的真空干燥器中干燥。