欧玛仕生物来为您详细解答马血清主要成分及实验用途
马血清是马匹血液去除血细胞、纤维蛋白原后的上清液,属于天然动物血清,成分复杂,主要包含:
1. 蛋白质类
白蛋白:维持渗透压、载体蛋白,结合激素、脂类、重金属;球蛋白(IgG 为主):免疫球蛋白,含有多种天然抗体、补体;
转铁蛋白:结合铁离子,供给细胞,抑制自由基;纤连蛋白、粘连蛋白:促进细胞贴壁、铺展;多种生长因子:PDGF、EGF、FGF 等,促细胞增殖;
2. 小分子营养物质
氨基酸、葡萄糖、脂类、胆固醇、脂肪酸、维生素;
3. 无机盐与离子
钠、钾、钙、镁、磷酸根等,维持细胞离子环境;
4. 激素与细胞因子
胰岛素样生长因子、类固醇激素、多种细胞因子;注意:马血清含有**补体、内毒素、部分未知生物活性物质**,批次差异大,灭活处理可破坏补体。
对比胎牛血清 FBS:马血清生长因子含量整体低于胎牛血清,蛋白、免疫球蛋白含量更高,价格通常低于胎牛血清。
实验用途
1. 细胞培养
1)部分原代细胞、神经细胞、神经干细胞培养:马血清常和胎牛血清搭配使用,利于神经元存活;
2)杂交瘤细胞、部分肿瘤细胞系培养;
3)不适合对生长因子要求极高的快速增殖细胞**,这类更适合胎牛血清;
常用:56℃ 30min 热灭活,消除补体毒性,减少细胞裂解。
2. 免疫学实验
1)封闭液:免疫组化 IHC、免疫荧光 IF,用马血清做封闭,减少非特异性结合;马来源二抗体系优先用马血清封闭;
2)抗原‑抗体实验,制备抗血清原料;
3)补体实验:未灭活马血清可提供补体参与补体介导溶血实验;
3. 微生物、寄生虫相关体外培养
部分原虫、寄生虫体外培养体系添加马血清。
4. 疫苗、抗体制备相关
动物免疫佐剂体系、部分兽用疫苗培养基组分。
使用注意要点
1. 热灭活:免疫实验、细胞培养多数场景建议灭活;做补体功能实验不能灭活;
2. 批次差异:天然血清每批活性不一样,正式实验前建议做批次筛选;
3. 储存:‑20℃冻存,避免反复冻融;4℃短期存放;
4. 污染风险:可能含有病毒、支原体,实验级血清会经过过滤灭活质控;
5. 与胎牛血清区别:
胎牛血清:生长因子丰富,适合大多数快速增殖细胞;
马血清:IgG 含量高,更适合神经细胞、封闭液,增殖促生长能力偏弱。
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