上海欧玛仕生物血清保存与使用注意事项介绍

上海欧玛仕生物血清保存与使用注意事项如下

一、保存条件

1. 长期保存：-20℃-30℃冷冻避光保存，严禁-80℃长期反复冻融；分装成小体积（5-20mL /管），避免整瓶反复冻融。

2. 短期保存：4℃可放置2-7天，超过7天建议冷冻；不要4℃长期存放，易降解、长微生物。

3. 禁止-20℃与4℃来回反复切换，反复冻融会破坏蛋白、生长因子，血清品质下降。

4. 运输全程干冰冷链；收到后优先分装冻存，不要整瓶放4℃。

5. 分装要点：无菌超净台内操作，分装后标注日期，避免大瓶多次开盖污染。

二、解冻操作

1. 推荐解冻方式：2-8℃冰箱过夜解冻，或37℃水浴间断摇晃，禁止直接沸水、高温快速解冻。

2. 解冻过程中会出现少量絮状沉淀（脂蛋白、纤维蛋白原），属于正常现象，不代表变质。

3. 完全融化后轻柔颠倒混匀，不要剧烈震荡。

4. 沉淀处理：少量沉淀无需过滤直接使用；沉淀较多可 4000g 离心 5‑10min 取上清，或 0.22μm 滤膜过滤，不要直接倒掉沉淀。

三、使用注意事项

1. 常规细胞培养不建议热灭活；仅部分免疫细胞、补体敏感实验需要。

热灭活标准：56℃，30min，水浴，间断摇晃；温度过高、时间过长会严重破坏活性蛋白。

2. 添加比例：常规细胞培养终浓度 5%‑20%，按细胞类型调整；配制完全培养基时，血清最后加入。

3. 过滤：商品化血清已经 0.22μm 除菌过滤；不要再次盲目过滤，部分蛋白会被滤膜吸附损失；如出现大量沉淀，再过滤处理。

4. 污染判断浑浊、变色、出现大量菌丝/细菌团块、有异味，视为污染，直接丢弃。少量白色絮状物≠污染。

四、常见误区

1. 血清-20℃化开后，剩余部分放回-20℃反复冻融化开一次用不完，提前分装小管，一次一管。

2. 37℃水浴长时间放置，化开后不及时使用化开后尽快配培养基，4℃存放不超7天。

3. 出现沉淀就判定血清变质丢弃低温储存很容易产生脂蛋白沉淀，离心取上清即可。

4. 所有实验都做 56℃热灭活绝大多数肿瘤细胞、普通细胞系不需要热灭活，灭活后部分生长因子活性下降。

五、配好的完全培养基保存

加了血清的完全培养基：4℃避光保存，建议 2-4 周内用完；不建议-20℃冻存完全培养基，冻融容易血清析出沉淀，细胞培养效果变差。
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